Inattivazione fotodinamica dei fibroblasti umani primari attraverso il blu di metilene e il blu di toluidina O
La citotossicità del trattamento di cellule umane è un'importante determinante dell'applicabilità clinica e del valore di attivazione fotodinamica (PDI) antimicrobica. Abbiamo valutato la citotossicità in vitro della PDI in fibroblasti primari umani usando blu di metilene (MB) e blu di toluidina O (TBO) come fotosensibilizzanti.
Metodi
I fibroblasti primari umani sono stati esposti a regimi di PDI che sono stati utilizzati per l'inattivazione di Staphylococcus aureus resistente alla meticillina (MRSA) e di Escherichia coli multiresistente ai farmaci (MDR E. coli). L'attività mitocondriale successiva all'esposizione è stata valutata dopo 24 ore usando il saggio metiltiazolo tetrazolo ed è poi stata comparata con i valori di pretrattamento.
Risultati
L'attività mitocondriale dei fibroblasti primari umani è stata ridotta del 27% dopo l'esposizione alla luce (163.8 J/cm2) e all'MB (50 μg/ml). Ad una concentrazione di TBO precedentemente dimostrata per indurre il 99.91% e l'83.2% di riduzione in un conteggio vitale per MRSA e MDR E. coli, rispettivamente, il 39,6% dei fibroblasti sono stati foto-inattivati.
Conclusione
I nostri risultati hanno mostrato che MB/TBO-PDI non induce significativi effetti citotossici sui fibroblasti umani in coltura.
Fonte:
Titolo: Photodynamic inactivation of primary human fibroblasts by methylene blue and toluidine blue O
Rivista: Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. doi: 10.1016/j.pdpdt.2012.05.001
Autori: Nasim Kashef, Gita Ravaei Sharif Abadi, Gholamreza Esmaeeli Djavid
Affiliazioni: Department of Microbiology, School of Biology, College of Science, University of Tehran, Tehran, Iran
Department of Microbiology, School of Biology, College of Science, University of Tehran, Tehran, Iran
Iranian Center for Medical Lasers (ICML), Academic Center for Education, Culture and Research (ACECR), Tehran, Iran
Abstract:
Background
An important determinant of the clinical applicability and value of antimicrobial photodynamic inactivation (PDI) is the cytotoxicity of the treatment to human cells. We evaluated the in vitro cytotoxicity of PDI to primary human fibroblasts using methylene blue (MB) and toluidine blue O (TBO) as the photosensitizers.
Methods
The primary human fibroblasts were exposed to PDI regimes that were used for the inactivation of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and multi-drug resistant Escherichia coli (MDR E. coli). Mitochondrial activity subsequent to exposure was evaluated after 24 h using the methylthiazoletetrazolium assay and compared to pretreatment values.
Results
Mitochondrial activity of primary human fibroblasts was reduced by 27% after exposure to light (163.8 J/cm2) and MB (50 μg/ml). At a TBO concentration previously demonstrated to induce 99.91% and 83.2% reduction in a viable count for MRSA and MDR E. coli, respectively, 39.6% of the fibroblasts were photo-inactivated.
Conclusion
Our findings showed that MB/TBO-PDI did not induce significant cytotoxic effects on human fibroblasts in culture.
