La demetilazione del promotore contribuisce alla sovraespressione di TSLP nelle lesioni cutanee di pazienti con dermatite atopica
La linfopoietina timica stromale (TSLP) gioca un ruolo importante nel mantenimento dell'omeostasi delle cellule T e sembra essere centrale anche nello sviluppo dei sintomi allergici, soprattutto dell'asma e della dermatite atopica (AD). La TSLP umana risulta iperespressa nei cheratinociti di pazienti con AD acuta e cronica; tuttavia, non è stato ancora definito il suo meccanismo di sovraespressione.
Obiettivo
Studiare se l'espressione di TSLP sia regolata da un'aberrante metilazione del DNA del promotore di TSLP nei cheratinociti di pazienti con AD.
Metodi
Con la PCR-trascrittasi inversa quantitativa real-time e l'immunoistochimica, sono stati misurati i livelli in mRNA e proteina di TSLP sui campioni di cute lesionata provenienti da 10 bambini con AD e da 10 controlli sani. È stato eseguito il sequenziamento con bisolfito per determinare lo stato di metilazione del promotore di TSLP, mentre la 5-azacitidina (5-aza) — un inibitore della DNA metiltransferasi — è stata utilizzata per determinare l'influenza della metilazione del DNA sull'espressione di TSLP.
Risultati
I livelli di espressione, in mRNA e proteina, di TSLP sono risultati aumentati nelle lesioni cutanee dei pazienti con AD rispetto ai controlli sani. Inoltre, è stata trovata un'ipometilazione del promotore del gene TSLP nelle lesioni cutanee di pazienti con AD, mentre i cheratinociti trattati con 5-aza hanno ridotto il livello di metilazione del promotore di TSLP e hanno aumentato la trascrizione di TSLP.
Conclusioni
La demetilazione di una specifica regione regolatoria del gene TSLP potrebbe contribuire alla sovraespressione di TSPL nelle lesioni cutanee di pazienti con AD.
Storia della pubblicazione:
Titolo: Promoter demethylation contributes to TSLP overexpression in skin lesions of patients with atopic dermatitis
Rivista: Clinical and Experimental Dermatology. doi: 10.1111/ced.12206
Autori: Y. Luo, B. Zhou, M. Zhao, J. Tang, Q. Lu
Affiliazioni:Department of Dermatology, Hunan Children's Hospital, Changsha, Hunan, China Department of Dermatology, Second Xiangya Hospital, Central South University, Hunan Key Laboratory of Medical Epigenomics, Changsha, Hunan, China
Abstract:
Background Thymic stromal lymphopoietin (TSLP) plays an important role in promoting T-cell homeostasis, and appears to be a central player in the development of allergic symptoms, especially in asthma and atopic dermatitis (AD). Human TSLP is overexpressed in keratinocytes of patients with acute and chronic AD. However, the mechanism of TSLP overexpression remains unclear. Aim To investigate whether TSLP expression is regulated by aberrant DNA methylation modification of the TSLP promoter in keratinocytes of patients with AD. Methods mRNA and protein levels of TSLP in lesional skin samples from 10 children with AD and 10 healthy controls were measured by real-time quantitative reverse transcriptase-PCR and immunohistochemistry. Bisulfite sequencing was performed to determine the methylation status of the TSLP promoter, and 5-azacytidine (5-aza), a DNA methyltransferase inhibitor, was used to determine the influence of DNA methylation on TSLP expression. Results TSLP mRNA and protein expression levels were increased in skin lesions from patients with AD compared with healthy controls. Moreover, promoter hypomethylation of the TSLP gene was identified in skin lesions from patients with AD, and treating keratinocytes with 5-aza reduced the methylation level of the TSLP promoter and increased TSLP transcription. Conclusions DNA demethylation of a specific regulatory region of the TSLP gene may contribute to TSLP overexpression in skin lesions in patients with AD.
