Nei sebociti umani SZ95 la leptina promuove un profilo lipidico pro-infiammatorio e l'espressione di vie infiammatorie
La leptina, un ormone secreto dagli adipociti che regola il peso, è nota per fare da collegamento tra il metabolismo lipidico e l'infiammazione in diversi tipi cellulari; tuttavia, non è ancora stato studiato il suo ruolo nei sebociti umani.
Obiettivi
Lo scopo dello studio è stato quello di indagare gli effetti della leptina sulle ghiandole sebacee umane.
Metodi
Attraverso la RT-PCR quantitativa e l'immunochimica è stata rilevata l'espressione di Ob-Rb; invece l'analisi lipidica è stata eseguita con la cromatografia su strato sottile ad alta prestazione, con la gascromatografia-spettrometria di massa e con la spettrometria di massa a tempo di volo. Sono stati visualizzati i corpi lipidici attraverso la colorazione BODIPY associata alla microscopia a fluorescenza e alla citometria a flusso; con la RT-PCR sono stati valutati i livelli mRNA di IL-6 e IL-8, mentre il loro rilascio è stato esaminato con il saggio immunoassorbente legato ad un enzima. Infine il Western blot è servito per determinare le espressioni proteiche di COX-2 e 5-LOX nonché la fosforilazione di p65 e STAT3.
Risultati
È stata rilevata l'espressione di Ob-Rb nelle ghiandole sebacee umane e nei sebociti umani SZ95 in coltura. Il trattamento dei sebociti SZ95 con leptina ha portato ad un allargamento dei corpi lipidici intracellulari, ha aumentato il rapporto tra acidi grassi insaturi/saturi e ha diminuito i livelli di vitamina E. Inoltre, a sostegno del suo ruolo pro-infiammatorio, la leptina ha indotto l'espressione di COX-2 e 5-LOX nei sebociti SZ95 ed ha aumentato la produzione delle citochine IL-6 e IL-8. Dopo il trattamento con leptina sono risultate attivate le vie di segnalazione NF-κB e STAT-3, indicando che queste stesse vie sono attive nei sebociti umani.
Conclusioni
I nostri risultati suggeriscono che la via di segnalazione della leptina può essere coinvolta nella regolazione pro-infiammatoria del metabolismo lipidico sebaceo e nell'induzione di enzimi e citochine infiammatorie.
Storia della pubblicazione:
Titolo: Leptin promotes a pro-inflammatory lipid profile and induces inflammatory pathways in human SZ95 sebocytes
Rivista: British Journal of Dermatology. doi: 10.1111/bjd.13229
Autori: D. Törőcsik, D. Kovács, E. Camera, M. Lovászi, K. Cseri, G.G. Nagy, R. Molinaro, R. Rühl, G. Tax, K. Szabó, M. Picardo, L. Kemény, C.C. Zouboulis e É. Remenyik
Affiliazioni:Department of Dermatology, Faculty of Medicine, University of Debrecen, Debrecen, Hungary Laboratory of Cutaneous Physiopathology and Integrated Centre of Metabolomics Research, San Gallicano Institute of Dermatology, IRCCS, Rome, Italy Department of Internal Medicine, Faculty of Medicine, University of Debrecen, Debrecen, Hungary Laboratório de Imunofarmacologia, Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Brazil Department of Biochemistry and Molecular Biology, Faculty of Medicine, University of Debrecen, Debrecen, Hungary Department of Dermatology and Allergology, University of Szeged, Szeged, Hungary MTA-SZTE Dermatological Research Group, University of Szeged, Szeged, Hungary Departments of Dermatology, Venereology, Allergology and Immunology, Dessau Medical Center, Dessau, Germany
Abstract:
Background Leptin, the adipocyte-secreted hormone that regulates weight, is known to link lipid metabolism with inflammation in various cell types, however its role in human sebocytes has not yet been investigated. Objectives The purpose of the study was to investigate the effects of leptin in human sebaceous gland biology. Methods Ob-Rb expression was detected by real time quantitative RT-PCR and by immunochemistry. Lipid analysis was performed by high performance thin layer chromatography, gas-chromatography-mass spectrometry and time of flight mass spectrometer mass detection. Lipid bodies were visualized by BODIPY staining using fluorescent microscopy and measured by flow cytometry. IL-6 and IL-8 mRNA levels were assessed by real time quantitative RT-PCR and their release was evaluated by enzyme-linked immunosorbent assay. COX-2 and 5-LOX protein expressions as well as the phosphorylation of p65 and STAT3 were determined by Western blot analysis. Results Expression of Ob-Rb was detected in human sebaceous glands and in cultured human SZ95 sebocytes. The treatment of SZ95 sebocytes with leptin led to an enlargement of intracellular lipid bodies, increased the ratios of unsaturated/saturated fatty acids and decreased vitamin E levels. Further supporting a pro-inflammatory role, leptin induced COX-2 and 5-LOX expression in SZ95 sebocytes and augmented the production of IL-6 and IL-8 cytokines. Upon leptin treatment, STAT-3 and NF-κB pathways were activated indicating that these known leptin signalling pathways are active in human sebocytes. Conclusions Our findings suggest that leptin signalling may be involved in the pro-inflammatory regulation of sebaceous lipid metabolism and in the induction of inflammatory enzymes and cytokines.
