Lo Streptococcus sanguinis e il siero di pazienti con la malattia di Behçet stimolano l'espressione di membrana dell'α-enolasi, nelle cellule endoteliali microvascolari del derma umano
L'enzima glicolitico α-enolasi è una proteina legante il plasminogeno che si trova di solito nel compartimento citosolico.
Tuttavia, l'α- enolasi può essere espressa sulla superficie delle cellule a seguito di uno stimolo infiammatorio che agisce con un meccanismo ancora sconosciuto. Abbiamo studiato gli effetti di Streptococcus sanguinis (S. sanguinis) e del siero di pazienti con malattia di Behçet (BD) sull'espressione e sulla distribuzione dell'α-enolasi nelle cellule endoteliali microvascolari del derma umano (HDMECs). Le HDMECs sono state stimolate con una coltura di S. sanguinis e con il siero di pazienti attivi per BD. Le HDMECs incubate per 6, 12 o 24 ore sono state poi raccolte, e inoltre sono state estratte le frazioni proteiche citoplasmatiche e di membrana.
L'espressione e la distribuzione dell'α-enolasi sono state analizzate utilizzando la metodica di frazionamento subcellulare e l'immunoblotting; mentre la localizzazione subcellulare dell'α-enolasi è stata valutata anche mediante immunocitochimica. S. sanguinis ha stimolato l'espressione di α-enolasi nel comparto membranoso delle HDMECs in modo dose- dipendente. Questo modello è stato osservato anche per le HDMECs incubate con sieri di pazienti affetti da BD. Sebbene l'incubazione di HDMECs con il siero proveniente da soggetti sani di controllo abbia aumentato l'espressione di membrana dell'α-enolasi, l'incubazione con i sieri di pazienti affetti da BD ha portato ad una precoce e più alta espressione di questa glicoproteina sulle membrana cellulare delle HDMECs. L'immunocitochimica ha rivelato una forte immunocolorazione di α-enolasi nel citoplasma e sulla membrana citoplasmatica delle HDMECs incubate con S. sanguinis o con sieri di pazienti con BD. In conclusione, questi risultati indicano che l'infezione da S. sanguinis e il siero di pazienti con BD nella forma attiva sono stimoli infiammatori che possono indurre l'espressione di membrana dell'α-enolasi nelle cellule endoteliali.
L'α- enolasi espressa sulla membrana potrebbe potenzialmente reagire con gli anticorpi anti-α-enolasi nei sieri di pazienti con BD, determinando un aumento dell'infiammazione.
Storia della pubblicazione:
Titolo: Streptococcus sanguinis and the sera of patients with Behçet’s disease stimulate membrane expression of α- enolase in human dermal microvascular endothelial cells
Rivista: Archives of Dermatological Research April 2013, Volume 305, Issue 3, pp 223-232
Autori: Suhyun Cho, Zhenlong Zheng, Sung Bin Cho, Min Ju Choi, Kwang Hoon Lee, Dongsik Bang
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Abstract:
The glycolytic enzyme α- enolase is a plasminogen- binding protein that is generally found in the cytosolic compartment. However, α-enolase can also be expressed on cell surfaces following an inflammatory stimulus via an unknown mechanism. We investigated the effects of Streptococcus sanguinis (S. sanguinis) and the sera of patients with Behçet’s disease (BD) on the expression and distribution of α-enolase in human dermal microvascular endothelial cells (HDMECs). HDMECs were stimulated with cultured S. sanguinis and the sera of active BD patients. HDMECs incubated for 6, 12 or 24 h were harvested, and the membrane and cytoplasmic fractions of proteins were extracted. The expression and distribution of α-enolase were analyzed using subcellular fractionation and immunoblotting. Subcellular localization of α-enolase was also assessed by immunocytochemistry. S. sanguinis stimulated the expression of α-enolase in the membranous compartment of HDMECs in a dose-dependent manner. This pattern was also observed in HDMECs incubated with BD patients’ sera. Although incubation of HDMECs with sera from healthy controls increased membrane expression of α-enolase, incubation with BD sera resulted in earlier and higher expression of this glycoprotein in the cellular membrane of HDMECs. Immunocytochemistry revealed strong immunostaining of α- enolase in the cytoplasm and cytoplasmic membrane of HDMECs incubated with S. sanguinis or BD patients’ sera. In conclusions, these results indicate that S. sanguinis infection and the sera of BD patients with active disease are inflammatory stimuli that can induce membranous α- enolase expression in endothelial cells. Membrane- expressed α-enolase could potentially react with anti-α- enolase antibodies in BD patients’ sera, resulting in increased inflammation.
